Sisu

• Parem vaatamine
• Identifitseerimine ja klassifitseerimine
• Teostatavuse tuvastamine
• Rakustruktuuride tuvastamine

Mikrobioloogid uurivad mikroskoobi abil mikroorganismide, näiteks vetikate, bakterite, algloomade, seente ja viiruste omadusi. Kuigi mõnda organismi, nagu algloomad ja pärmirakud, on slaididelt hõlpsasti näha, vajavad bakterirakud värvimist. Teadlased on bakterirakkude ja rakustruktuuride visualiseerimise parandamiseks välja töötanud mitu meetodit, näiteks Grami värvimise tehnika, happekindla värvimise ja fluorestseeruva värvimise. Selliste värvimismeetodite abil on võimalik kindlaks teha struktuurilised omadused, mis aitavad baktereid klassifitseerida.

Parem vaatamine

Bakteriaalsed organismid on nii väikesed, et enamik neist on nähtavad ainult mikroskoobi all 1000-kordse suurendusvõimega. Lihtne suuruse suurendamine ei taga siiski piisavat selgust, mistõttu tuleb bakterid enne vaatlemist värvida, et tagada visualiseerimiseks vajalik selgus.

Identifitseerimine ja klassifitseerimine

Bakterite värvimine bakteritüüpide eristamiseks on tuntud kui diferentsiaalvärvimine. Grammiplekk on diferentsiaalplekk, mis eristab baktereid rakuseina sisaldusest sõltuvalt. Selle meetodi korral reageerivad bakterirakud violetseks muutumiseks violetse kristallvärviga. Pleegitava aine lisamise kaudu kaotavad mõned bakterirakud oma värvi, teised mitte. Safraniinvärvi lisamise kaudu muutuvad värvunud rakud punaseks, samas kui bakterirakud, mis värvi ei kaota, jäävad violetsed. Rakke, mis muutuvad punaseks, nimetatakse gramnegatiivseteks organismideks ja rakke, mis ei muutu punaseks, liigitatakse gram-positiivseteks organismideks. Grami värvimismeetod pakub kiiret meetodit nakkustega seotud bakterite esmaseks tuvastamiseks. Samuti aitab happekindel värvimisprotsess spetsiifiliselt tuvastada mükobakterite hulka kuuluvate bakterite klassi kuuluvaid organisme, näiteks Mycobacterium tuberculosis.

Teostatavuse tuvastamine

Bakterikultuuride proovides on sageli oluline tuvastada elusate bakterirakkude olemasolu. Sellised meetodid nagu fluorestsentsvärvimine aitavad kindlaks teha, kas rakkude kultiveerimine on elujõuline või mitte. Elusbakteritel on võime muuta tetrasoolium-5-tsüano-2,3-ditolüülkloriid (CTC) värviks, millel on punane fluorestsents. Seega, kui CTC värvi kultuurid neid fluorestsentse eraldavad, näitab see elujõuliste bakterite olemasolu. Propiidiumjodiid on plekk, mis toimib ainult eluta rakkudel, millel on membraane kahjustatud, ja on seetõttu kasulik surnud bakterirakkude tuvastamiseks.

Rakustruktuuride tuvastamine

Värvimine annab meetodi erinevate rakustruktuuride selgeks visualiseerimiseks. Näiteks võimaldab Feulgeni värvimismeetod tuvastada bakterirakkude tuuma, samas kui Alberti värvimine on kasulik metakromaatiliste graanulite visualiseerimisel. Samamoodi võimaldab hõbedaga immutamise tehnika tuvastada spiroheetid. Lipukesi on lihtne jälgida, kui need on Ryu värviga värvitud. Malahhiidi roheline värvimine aitab tuvastada bakterite eoseid.