Sisu
Uuringud mikroobkultuuridega nõuavad sageli neis esinevate organismide tuvastamist. Kui toitainekeskkonda sisaldavale agarile viiakse väike osa kultuurist, on bakterite mass võimalik eraldada üksikuteks kolooniat moodustavateks üksusteks. Kõik need üksused arenevad eraldi kolooniates, millel on omadused, mis aitavad organismi tuvastada.
Eesmärk
Mikrobioloogilised uuringud nõuavad konkreetsete organismide morfoloogia uurimist. Mõnel juhul tuleb segukultuuris olevad organismid enne nende analüüsimist eraldada. Seega on oluline need mikroobikolooniad isoleerida. Bakterikultuurid sisaldavad ühes tilgas suurt hulka rakke. Agarplaadil tühjendamise teel külvamine lahjendab neid, nii et plaadi kindlale alale ladestub üks bakterirakk. Mitmeid neist üksikutest lahtritest eraldab nende vahele mõni millimeeter. Igaüks neist jaguneb, moodustades tuhandeid uusi rakke, põhjustades isoleeritud kolooniaid.
Põhimõte
Agarplaat annab toitaineterikka sööde, mis stimuleerib mikroorganismide kasvu ja paljunemist. Reovee külvamisel kasutatakse kvadrandstriatsiooni meetodit, milles kogu plaat jagatakse neljaks kvadrandiks. Ühest kvadrandist teise liikudes toimub algse kultuuri järk-järguline lahjendamine kogu saadaoleval pinnal. Kvadrand, millest alustate, näitab tihedat ja eristamatut mikroobide kasvu, mis näeb välja nagu mikroorganismide vaip, samas kui viimane üksikuid kolooniaid.
Materjalid
Heitgaaside külvamiseks on vaja toitainete agariplaate, inokuleerimiseks mõeldud silmus, bakterite kultuuri, desinfitseerivat lahust, näiteks 10% -lüsooli ja Bunseni põletit. Samuti vajate turvavarustust, näiteks põlle, kindaid ja pritsprille. Venitusarmide moodustamiseks mõeldud inokulaat on valmistatud bakterikultuurist, kasutades silmus ja toiteagar-plaatide kriimustamist. Bunseni põleti on mõeldud käepideme süttimiseks soonte ajal. Enne katse alustamist kasutage pinna puhastamiseks desinfitseerimislahust.
Meetod
Esimese kvadrandi külvamiseks edasi-tagasi liikumisega kasutage väikest kogust inokulaati. Leegitage käepide ja laske sellel jahtuda, puudutades seda inokuleerimata agariplaadi osaga. Puudutage seda just külvatud ala ühte otsa ja sirutage see sealt teise kvadrandini. Leegitage ja jahutage silmus uuesti ning teisest alast töötage kolmas kvadrant. Korrake sama protsessi neljanda kvadrandiga.
