Sisu

• Juhised
• Veeru taastamine
• Kuidas
• Teade
• Mida sa vajad

Kõrge jõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) on tavaline laboratoorsete analüüside meetod, mille puhul proov jaotatakse kolonni läbimisel keemilisteks komponentideks. See kolonn täidetakse poorse materjaliga, tavaliselt silikageeliga. Standardne pöördfaasi kolonn nagu C8 võib mõnikord ummistuda või saastuda. Neid veerge saab kasutada väga lihtsate tehnikate abil.

Juhised

Õige lahusti võib saada määrdunud kolonni (Jupiterimages / likvideerija / Getty Images)

Veeru taastamine

1. Vabastage veerg ja pöörake selle asendisse, nii et liikuv faas siseneb läbi selle, mis on tavaliselt veeru väljund. Kinnitage kolonni teise otsa (mis oli algne kirje) pistikupesa ja laske see tühjeneda.

2. Pumbake rea lahusteid polaarsuse vähenemise järjekorras. Soovitatav põhisarja on alustada metanooliga, seejärel lülitada atsetonitriili, seejärel atsetonitriili / isopropanooli (75:25), isopropanooli, metüleenkloriidi ja heksaani. Kui kolonnis olev liikuv faas oli absorbent, soovitatakse enne veega läbimist metanoolis. Piisavalt piisab voolust 1 kuni 2 milliliitrit minutis ja pumbatakse umbes kümme mahuosa igast lahustist. Mahtkolonn on kolonni siseruum ja see arvutatakse (0,7 x pi x (DI / 2) ^ 2 x L), kus DI on veeru siseläbimõõt ja L on pikkus.

   
   

3. Kolonni pumbatakse veel kümme mahtu isopropanooli, et valmistada see kasutamiseks koos esialgse liikuva faasiga. Kui algne liikuv faas on pehmendatud, siis pumbake vesi läbi kolonni ka pärast isopropanooli, enne kui pöördute tagasi algsesse liikuvasse faasi.

4. Vabastage kolonni, pöörake see tagasi ja kinnitage uuesti nii, et see oleks algasendis (nii et liikuv faas siseneb veeru paremasse serva). Ühendage kõlari väljund detektoriga uuesti.

Kuidas

• Kui see protsess kolonni põhjalikult ei puhasta, võib kasutada dimetüülsulfoksiidi (DMSO) ja dimetüülformamiidi (DMF) 50:50 segu. Valkude ja metalliioonide jäägid võivad vajada muid lahusti tüüpe, nagu ioonide säästvad reagendid või etüleendiamiintetraäädikhappe (EDTA) lahus.

Teade

• Mõnedes seadmetes on selg, et sisselaskeava juures on töötlemata metallist sõel. Sel juhul võimaldab kolonni tagastamine statsionaarse faasi kolonnist lahkuda ja seda ei soovitata. Kui te pole kindel, konsulteerige oma edasimüüjaga.
• Selles protsessis kasutatav lahusti on allaneelamisel ja sissehingamisel potentsiaalselt toksiline. Käsitsemisel kasutage tavalisi ettevaatusabinõusid.

Mida sa vajad

• HPLC seade
• Vesi
• Metanool
• Atsetonitriil
• Isopropanool
• Metüleenkloriid
• Heksaan